PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构，就要避开它。如这一段不能形成二级结构，那就可以在这一区域设计引物。现在可以在这一保守区域里设计一对引物。一般引物长度为15~30碱基，扩增片段长度为100~600碱基对。让我们先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%。而且四种碱基的分布最好随机。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否则P1引物设计的就不合理。应重新寻找区域设计引物。同时引物之间也不能有互补性，一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补。引物确定以后，可以对引物进行必要的修饰，例如可以在引物的5′端加酶切位点序列；标记生物素、荧光素、地高辛等，这对扩增的特异性影响不大。但3′端绝对不...　

作者：（德）乌韦·狄姆翻译：陈俊推荐阅读年龄：9～14岁 ★★★目录第一回 赢得猪崽归第二回 欢乐常伴愁烦第三回 恶邻狗吠第四回 象形文字猪第五回 噜噜的第一功第六回 豪华猪屋落成日第七回 令人厌恶的词语第八回 伤别离第九回 又建奇功第十回 百感交集的圣诞节第十一回 人去猪场空第十二回 众里寻它千百度第十三回 刀下留猪第十四回 豁出去了第十五回 少年不识愁滋味第十六回 楚碧驯猪第十七回 噜噜成了吉祥物《跑猪噜噜》　　一头黑黑壮壮的猪居然在繁华的都市被当做宠物收养，并成长为全国的赛跑冠军。　　噜噜，快跑！快跑！ 终于发现了噜噜的一大特长就是跑，可决赛的枪声响起之后，它却为对手猪MM神魂颠倒，结果一对坠入情网的猪像逛公园一样逛到终点。 作为一只家养的宠物猪，噜噜还有许多离奇的故事。一只本该在荒原上奔跑的牧猪，在城市的夹缝中生存、长大并脱颖而出，成了一只人人倾慕的猪。...　

++++++++++++++++++++++++++++++++幽默大全之外国卷家庭篇父子之间　　 父女之间　　 母子之间　　 母女之间　　 祖孙之间兄弟之间　　 姐妹之间　　 翁婿之间　　 家　教　　 家务活儿子眼中的父亲 7岁：“爸爸真了不起，什么都懂！”14岁：“好像有时候说得也不对……”20岁：“爸爸有点落伍了，他的理论和时代格格不入。”25岁：“‘老头子’一无所知。毫无疑问，陈腐不堪。”35岁：“如果爸爸当年像我这样老练，他今天肯定是个百万富翁了……”45岁：“我不知道是否该和‘老头’商量商量，或许他能帮我出出主意……”55岁：“真可惜，爸爸去世了。说实在话，他的看法相当高明！”60岁：“可怜的爸爸！您简直是位无所不知的学者！遗憾的是我了解您太晚了！”为您着想 汤姆·霍瓦德17岁时就长得和他父亲一样高了。因而每逢他想和朋友们晚上外出时，就借霍瓦德先生的衣服穿。...　

上司时代　　这个时代现在看来是一个蒙昧时代，野蛮时代。如果和此前的时代进行比较的话，那可是一个好的时代。是一个看起来比现在有意思的时代。　　土司时代开始的时候，力量是非常强大的，连众多的大神小神的系统都土崩瓦解了。每一个村子的神，每一个家庭的神灵都在某一天消失了。大家都服从了土司认定的那个来自印度，那个白衣之邦的佛陀，以及环坐在他莲座周围那些上了天的神灵们。神灵们脸上都带着对自己的道行充满自信的神情。　　土司时代，木犁上有了铁的烨头，更不要说箭镞是多么锋利了。　　还是这个时代，有了专结甜美果子的树木，土地也好像比以前肥沃了。有传说说，那个时代刚刚开始的时候，甚至出现了能结十二个穗子的青稞。　　第一个土司不仅仅是个马上的英雄。他比聪明人多一个脑袋，比一般的人多两个脑袋，比傻子多一百个脑袋。其它创造我们不去说它，就只说和我们要讲的故事有关的吧。他的一个脑袋里的一个什...　

　　千里达木　 　售价:39000元/条　　高希霸-长　　售价:36000元/条　　高希霸世　　 售价:22600元/条　　蒙特一号　　 售价:19024元/条　　蒙特纸盒四　 售价:12720元/条　　优民-美冠　　售价:12000元/条　　天价香烟名称及价格表（2）　　罗密欧1号　　　9968元/条　　逢塞克佳　　　　8600元/条　　软密欧3号　　　8536元/条　　罗密欧贝　　　　6496元/条　　优民丽嘉　　　　5992元/条　　2盒熊猫　　　　5000元/条　　天价香烟名称及价格表（3）　　彼业赛猎人　　　　4520元/条　　罗密欧小　　　　3080元/条　　彼亚赛小赛　　　　2960元/条　　高希霸迷尼　　　　2490元/条　　黄鹤楼-1916　　　 1800元/条　　钻石-软景泰　　　 1800元/条　　芙蓉王钻王　　　　1600元/条　　冬虫夏草-硬盒　　 1600元/条　　黄鹤楼-硬感恩　　 1500元/条...　

补疑　　三字诀　　修真诀，要心传，无师指，是枉然。有渐修，有顿悟，安勉分，两路作。上智少，中士多，设渐法，中士科。先修命，后修性，渐归顿，是真行。有药物，有火候。理幽深，当细究。安坤炉，立乾鼎，配阴阳，头一等。也用刚，也用柔，两相应，是丹头。活中死，死中活，死活明，万缘脱。真藏假，假出真。会运法，出凡尘。我是我，它是它，知的了，不遭魔。害生恩，恩生害，不被瞒，揭覆盖。火上焰，水下流，颠倒过，住瀛洲。道心生，人心灭，黑中白，光皎洁。空即色，色即空，色空祛，大神通。有法相，有色相，色相离，法相亮。有逆运，有顺行，顺则死，逆则生。有还丹，有大丹，两事理，细研钻。须持心，须炼己，固本根，利出否。分内外，辨主宾，常返照，旧换新。朋来坤，朋丧艮，转枢机，无危困。龙本恶，虎本颠，二物伏，性情绵。戊应外，己定内，变刀圭，不昏昧。水中金，火中木，锻炼成，本原复。上弦金，下弦水，金...　

一。一定要阅读老大的新手必读如果你实在找不到，喏，地址在这里：mnbvc/new/law.htm拜托你仔细的读一遍，把每个字都印入自己的灵魂里，别总问一些很弱智的问题，比如什么我发不了帖子，如何贴图等等。如果你坚持问了，没有多少人回答你，你也千万不要感到委屈。不是各位mopper不热情，是你提的问题总是浇灭大家的激情。二。如何提高访问量和回帖数的问题把耳朵附过来，让偶悄悄的对你说：其实啊，最好的方法就是-贴美女图片。。。。。。。当然，这些图片最好是真实，活生生的，最好就是你身边的漂亮mm的。估计你贴明星照片是没有多少人感兴趣的。据说mop上聚集了全国最变态的一群流氓，如果你贴了一些让他们感到兴奋的，YY不止的照片的话，他们是不会亏待你的其实这群流氓是很义气，很有职业道德的。当然，偶也是这群流氓中的一个。。。。。。说到贴图，又分为两个流派：一种人只贴漂亮mm的图片，一种人只贴超级恶心的图片。这两种...　

秀场活动现场基本没有肖像权的问题 法律规定过了借用场地协议书甲方：乙方：QQ电视台电视剧制作中心《LA5PP》摄制组为了支持影视事业的发展，繁荣影视文化事业，同时进一步拓展企业的社会知名度，甲乙双方经友好协商，达成如下协议：一． 甲方无偿提供“ ”场地，供乙方拍摄景点使用，时间为2001年 月 日至 月 日期间，共拍摄 天。乙方确认拍摄及时间后提前两天通知甲方。二． 乙方为感激甲方支持，将在本剧/集的片尾给甲方打上鸣谢单位及公司名称。三． 乙方保证不在甲方场地内拍摄暴力，色情以及有损甲方企业形象等情节内容，以维护甲方的声誉。四． 乙方在拍摄过程中如造成甲方场地的物品污损，将酌情承担维修赔偿的责任。五． 甲方安排电工和保安协助拍摄。六． 未尽事宜，双方将友好协商解决。七． 本协议书一式两份，双方各执一份，经签字盖章后生效。甲方： 乙方：QQ电视台电视...　

肥妞翻身大作战战斗一：那个女人 1　　“如果有全校最丑的女人选拔赛,隔壁班的美丽一定是当之无愧的校花啊！”　　“哈哈哈哈!对啊!那家伙居然还这么不知羞耻的叫美丽啊!看她那150斤的体型,还有满脸的痘子,杂草一样的头发……叫女鬼还差不多！”　　“那家伙只有150斤吗？我还以为她有200斤呢！”　　“是300斤吧！”　　什么时候，我能够不再从班上男生的嘴巴里听到这些嘲弄……　　“哟！美丽，你来了啊！今天我有点事，所以不想值日，就麻烦你啦！”　　“能够被班上最漂亮的小娜拜托，美丽真是你的福气啊！你应该不会拒绝吧！”　　一群女生打扮的光鲜亮丽，勾搭着身边的男人，向着教室门口走去。走在最后的小娜忽然转身，顺手扔了一袋垃圾到美丽身上，垃圾袋里不知道装了什么东西，撞到美丽的头上，鲜血立刻顺着额角淌下。...　

　　对斯佩里左右脑分工理论的认识　　美国心理生物学家斯佩里博士（Roger Wolcott Sperry，1913.8.20—1994.4.17）通过著名的割裂脑实验，证实了大脑不对称性的“左右脑分工理论”，因此荣获1981年度的“诺贝尔生理学或医学奖”。正常人的大脑有两个半球，大脑两半球之间由胼胝体连接沟通，构成一个完整的统一体。在正常的情况下，大脑是作为一个整体来工作的，来自外界的信息，经胼胝体传递，左、右两个半球的信息可在瞬间进行交流（以每秒10亿位元的速度彼此交流），人的每一种活动都是两半球信息交换和综合的结果。大脑两半球在机能上有分工，左半球感受并控制右边的身体，右半球感受并控制左边的身体。所谓割裂脑实验就是将大脑左、右两个半球之间的胼胝体割断，外界信息传至大脑半球皮层的某一部分后，不能同时又将此信息通过横向胼胝体纤维传至对侧皮层相对应的部分，每个半球各自独立地进行活动，彼此不能知道对侧半球的活...　

++++++++++++++++++++++++++++++++幽默大全之外国卷体育篇·足球教练·看足球赛不在那天安排葬礼 罗伯亚·德佛包夫的丈夫是一位足球教练，结婚30多年来只要他的足球队一有球赛，便什么也顾不得，全神贯注于他的赛事。有一天德佛包夫的丈夫心情特别不好，但他仍顾不得安慰妻子而要去参加比赛，德佛包夫怒从心起：“弗兰克，为了一场球赛你甚至会连我的葬礼都顾不得参加！”丈夫极其冷静地对妻子说：“罗伯亚，你放心好了，我决不会在有球赛的那天安排你的葬礼。”口袋装人 1986年在墨西哥举行的第13届世界杯足球赛上，摩洛哥队与英格兰队交战前，英格兰队教练罗布森曾夸口说：“在这场比赛中，我们英国人简直可以把摩洛哥队装进口袋里。”打成平局后，摩洛哥队的教练法里亚幽默地说：“蒙特利尔的天气实在太热了，罗布森先生不得不脱去外套……所以，他没有口袋把我们装起来。”...　

作者：奥格·曼狄诺前言下面是节选。在古老的东方，挑选小公牛列竞技场格斗有一定的程序、它们被带进场地，向手持长矛的斗牛士攻击，裁判以它受激后再向斗牛士进攻的次数多寡来评定这只公牛的勇敢程度。从今往后．我须承认，我的生命每天都在接受类似的考验.如果我坚韧不拔，勇往直前，迎接挑战．那么我一定会成功。我不是为了失败才来到这个世界上的，我的血管里也没有失败的血液在流动。我不是任人鞭打的羔羊，我是猛狮，不与羊群为伍。我不想听失意者的哭泣，抱怨者的牢骚，这是羊群中的瘟疫，我不能被它传染。失败者的屠宰场不是我命运的归宿。坚持不懈，直到成功。生命的奖赏远在旅途终点，而非起点附近。我不知道要走多少步才能达到目标．踏上第一千步的时候，仍然可能遭到失败。但成功就藏在拐角后面，除非拐了弯，我永远不知道还有多远。再前进一步，如果没有用，就再向前一步。事实上，每次进步一点点并不太难。坚持不懈，...　

作者：亦舒外婆有一个预感。她一直说外孙女儿，亦即是我，会嫁给一个穿军服的年轻人为妻。她说她亲眼看见的。有二十年了，当时我才三两岁，母亲怀着弟弟，外婆暂来我家帮着指挥佣人，我一直黏在她身边，十分亲热，她也特别爱护我。有一个下午，天气炎热，婆孙们玩累了，打中觉。当时我们家住北角继园台的老房子，偏厅面积就有一百平方米，平时没有客人来，外婆作主，在该处放一张藤榻，下午把我放在那里睡一会儿。母亲怀孕的期间，我情绪非常不安，俗称孩子这种表现为抢窝——知道弟妹要出世，怕失去宠爱及注意，于是时常无故哭闹。但即使吵得最凶的时候，早要把我放在凉快的藤榻上，我也会静下来，含着眼泪睡熟。母亲常说，那个夏季，是她一生中最难渡过的一段日子，结果还是难产。书归正传，就是在其中一个下午，外婆说她做了一个梦。梦见她的外孙女儿已经长大，并且结婚。...　

++++++++++++++++++++++++++++++++幽默大全之外国卷交通篇汽车司机 列车员 空中小姐 乘汽车 乘火车 火车误点 乘飞机考驾驶执照 闯红灯 车　祸 索　赔 告　示 　 　个个满意 司机：“嫌我开车开得差劲，简直是岂有此理！我干这一行已经15年了，坐车的个个满意，从没有哪个说过我一句不满的话呢！”客人：“是吗？那我太冒昧了。请问你开的是什么车？”司机：“灵柩车。”如果真的出了车祸 老太太要乘出租汽车。“司机，”她说，“我想让你送我去车站。”“好吧，太太。”司机说。“你得开慢点，小心点儿，警察不放下手，请不要走；路面水多，不要急转弯。”司机生气了：“好吧，太太，可是如果我们真出了车祸，你想进哪个医院呢？”小小误会 一位旅客乘一辆出租汽车出游。半路上他轻拍司机肩膀想问点事，司机吓得“哇——”地叫了起来。“喔，对不起，”旅客抱歉地说道，“没想到会吓了你……”...　

古奥运会从公元前776年起，到公元394年止，经历了1168年，共举行了293届。按其起源、盛衰，大致分为三个时期：（1） 公元前776年至公元前388年，公元前776年,伯罗奔尼撒的统治者伊菲图斯,努力使宗教与体育竞技合为一体。它不仅革新宗教仪式,还组织大规模的体育竞技,活动,并决定每4年举行一次。时间定在闰年的夏至之后。所以公元前776年的古代奥林匹克运动会就正式载入史册,成为古代奥运会的第1届。当时仅有一个比赛项目。即距离为 192.27米 的场地跑。这一时期各城邦之间虽有纷争，但希腊是一个独立的国家，政治、经济、文化都较发达，是运动会的黄金时期。特别是公元前490年，希腊雅典在马拉松河谷大败波斯军之后，民情奋发，国威大振，兴建了许多运动设施、庙宇等，参赛者遍及希腊各个城邦，奥运会盛极一时，成为希腊最盛大的节日。（2） 公元前388年至公元前146年，开始衰落。由于斯巴达和雅典长期的伯罗奔尼撤战争（公元前431年...　

101集后全国大赛篇之苦战山王（1）　　湘北战胜了丰玉，要向全国高中篮球界的天王——山王工业进行决定性的　　挑战。 山王队员们离开了湘北和丰玉的比赛赛场，安西教练遇到了北野教练。　　与此同时，其它队伍的比赛结果野出来了，爱和学院103：58战胜横玉工业，　　大荣学院81：48战胜富房，常诚高中79：34战胜原口商业，崛商74：40战胜町　　田三，浦安商业93：58战胜汤来工业，赛前媒体认为的各个强队都进入了第二　　场比赛，59所学校中，有27所打道回府了。　　湘北的住处，三井大叫：“看清楚了吧，看你们还敢不敢把我们列入C级。”　　宫城说湘北打败了A级的丰玉，应该是AA级，墙上贴着相田彦一发来的传真“祝　　大胜利”。　　樱木说，湘北和山王势均力敌，赤木叫大家不要得意忘形，这只是第一战，　　樱木说赤木自己都乐坏了还装假正经。　　这时，赤木接到电话，是深则体大的唐泽教练，他恭喜湘北旗开得胜，告诉...　

++++++++++++++++++++++++++++++++日期：2005-9-10 来源：互联网 编辑：风冷长河501 老师，是您不惜耗干了自己的心血才有了我们的成长。20年后的今天，是谁为您拂去双肩的粉笔灰？ 0500 想念您，怀念您－－老师！对您的怀念与祝福将与日俱增，让一幕幕脉脉深情与祝福盈满，好人一生平安！ 0499 深夜的灯光，照亮了您的白发，9月10日您放假，休息休息吧！ 0498 轻轻一声问候，不想惊扰您，只想真切知道您一切是否安好。身体安康是学生们最大的安慰。谢谢您付出的一切！ 0497 再也听不到你的教诲，对我来说，真是遗憾。对于你为我付出的辛劳，我无以为报，我说一声“老师，你好！” 0496 岁月流逝，我们都已长大可您的两鬓却已斑白。我们只能对您说：投之以桃，报之以李，老师，谢谢您！ 0495 老师天都黑了，您乖乖的，早点睡吧，晚安！老师我们喜欢您笑嘛，您笑起来好漂亮，真的！ 0494 是您托起我的理想之帆；是您点燃我的知识之火...　

中文版序 空海和大唐　　文／梦枕獏　　空海这个和尚，要说是日本这一国土所产、最早的一位“世界人”也无不可。　　“弘法大师”这一别名同为世人所熟知。　　公元七七四年出生于赞岐，八○四年渡海入唐，抵达长安，跟随着青龙寺惠果和尚学习密教，返回日本后，创建密教真言宗。　　要说是日本最伟大的宗教家，实在也无不可啊！　　当时，他已自学完成传入日本的部分密教（杂密），因此也有人认为，空海入唐之前，对于密教早已大略了然于心了。　　他的唐语说得有如唐人般流利。　　这也算是一种天才吧！　　空海入唐之时，长安有如即将掉落的果实。　　就像即将从树上掉落的果实那样的成熟。　　事实上，空海停留长安之际，曾历经两次皇帝更迭。　　与此同时，在长安，还有一位在日本享得大名的诗人白乐天，也就是白居易。　　这位白乐天，写出有名的《长恨歌》，也是在这个时候。　　《长恨歌》叙述唐玄宗和杨贵妃之间的凄美恋情...