PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构，就要避开它。如这一段不能形成二级结构，那就可以在这一区域设计引物。现在可以在这一保守区域里设计一对引物。一般引物长度为15~30碱基，扩增片段长度为100~600碱基对。让我们先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%。而且四种碱基的分布最好随机。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否则P1引物设计的就不合理。应重新寻找区域设计引物。同时引物之间也不能有互补性，一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补。引物确定以后，可以对引物进行必要的修饰，例如可以在引物的5′端加酶切位点序列；标记生物素、荧光素、地高辛等，这对扩增的特异性影响不大。但3′端绝对不...　

作者：王拥军前言　　前言　　酒，蕴含着人类数千年的文明。中国酒的发展已有数千年的悠久历史，酒文化是我国的政治、经济、历史文化等发展的缩影。几千年来，时时折射出灿烂辉煌的华夏古老文化之光。从古至今，美酒与英雄相得益彰，酒给了英雄豪杰不凡的壮举，多少侠忠义举之后英雄便借酒来抒发豪情壮志。千百年来多少文人墨客饮酒吟诵，借酒明志，留下佳作无数，赐予文化浓厚的生活气息。也是因为酒，才会有那么多美妙神奇的故事流传至今，一直为人们所津津乐道。　　有酒的地方就有酒文化，地域风光、人文景观、民俗风情、劳动追求皆为酒文化提供了丰富的源泉。从远古以来，酒便是祭祀天地、祖先的必备用品之一；在我国各民族中，无论是种种仪式习俗或是宴请宾客，酒在其中都不可或缺的。酒已逐渐成为了本民族的一种特殊文化的象征。而且，酒可以在书画里飘香，可以在音乐中流淌，可以在诗文中渲泻，也可以在舞蹈中飞扬。...　

　　　　时代 先秦 秦汉 三国两晋 南北朝 隋唐五代 宋辽 元 明 清 近代 现代 合计　　人数　　地区　　江苏 2 1 7 30 21 19 6 50 88 52 207 483　　浙江 1 4 2 13 20 47 16 44 52 46 178 423　　河南 15 22 23 14 46 31 9 6 7 6 36 215　　山东 9 16 13 26 5 22 13 8 17 5 44 175　　河北 6 10 10 7 27 7 25 5 7 9 58 171　　福建 — — — — 3 28 2 8 6 17 78 142　　安徽 3 3 7 1 5 12 1 11 28 13 37 121　　广东 — — 45 — 1 — — 6 9 40 63 119　　江西 — 1 1 — 1 50 10 14 4 6 30 117　　湖南 — — — — 4 3 1 2 11 22 64 107　　四川 — 6 6 — 8 17 — 2 6 9 45 99　　陕西 1 18 8 3 33 8 1 6 5 1 8 92　　长江三角洲 43 4 8 38 35 53 19 94 161 100 391 903　　　　表3 A表明长江三角洲（比本文所说9个地区稍大些）出的专家人数总计达903名占全国的34%。按省分算，河南、山东、河北、陕西、属历史型，是我国宋元以...　

前几天我趁班花朝我说话的时候（在夜总会）突然吻了她，先握她的手，然后KISS了差不多5SEC，爽~~~~~~~~~~~~~~~她好象不太拒绝，但是还是推开了我（她有BF的）。最后我的解释是：“我控制不住。”现在也没什么了，还是做朋友。回想起来，真是爽啊~~~~~~~大家有什么更BT的事情啊？欢迎讨论~~~(发帖时间:2002-7-29 13:56:41)-匿名人士71326 b回复(1):楼上的YY-匿名人士65036 b回复(2):留名先！！！！！！！！！！-五粮夜回复(3):没什么吧，再色就是 XX了呀，反正当年班级（文科）里长相OK的女生的PP都被偶拍了，其中2个的大BOBO偶也用拳头轻轻锤了一下，而且被其中一个给反弹了一下。-茂盛的秃子回复(4):楼上的，韩，你怎么能活到现在的，撞到鬼了！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！-CS365回复(5):只要是下雨的天气，偶就很兴奋很兴奋的说，然后就会遇到很色的事情~~~~...　

　　　　　　　美女万万娶不得的四个理由娶美女就如玩蹦极，刺激无需置疑，但不是每个人的心脏都承受得了。作为一个健康男人（至少爱美之心不缺），如果我说自己不想或不愿娶美女，这很容易让人联想到葡萄架下那口是心非的酸狐狸，其实，准确地说，我是不敢娶美女，因为我有心理障碍，至今未痊愈。　　障碍之一：人穷志短。我觉得美女正在远离平民，就像文学远离大众。即使那些在小巷子里长成的美女，某一天也会从青梅竹马的邻家阿哥的破自行车后座梭下来，头也不回地钻进巷子口守候着的奔驰或宝马。我从不抱怨美女的势利，好马配好鞍，佳人配“财”子嘛！在本市的几个高档住宅区，美女出现的频率要比一般的居民小区高得多，不过靓宅美人，看上去更和谐。美女们希望用美貌作敲门砖，轻盈地迈进幸福的殿堂，这无可厚非，就像有才的男人在择业时会特别计较待遇，美女们对时装、首饰乃至住所的挑剔是可以理解的。即便美女们不嫌贫爱富...　

　　第一，在多年的地质教育工作中，往往遇到一些学生的提问。在大学教育中，强调精简课程，减少授课时数，让学生增加自学时间，可是课外读物毕竟太少，希望老师们关心这一问题，写些小册子，以弥补不足。我想，大学生都具有自学的基本能力，做教师的应该满足他们的合理要求。除了正常的教学、科研工作以外，应该尽自己的力量给学生们再准备一些除教科书以外的，“精神副食品”，这是天经地义的。　　第二，多年来，我接触过不少地学夏令营的青少年朋友，他们大多是高中一二年级的在校学生，上过地理课，但缺乏野外实践知识。一旦来到山清水秀的名胜地，对着山石发呆，不知如何结合基本的地质或地理知识进行路线观察。虽有老师指导，也总难发挥他们主动学习的积极性，培养他们对地学的兴趣。因此，如果有一本能适当指导他们有兴趣往郊外去作地质旅行，帮助他们理解地理课内容的图书，岂不更好？　　第三，更多的生活在农村的青年人...　

我在看夕阳和晚霞。一个十九岁的女孩子固执和执着地喜欢黄昏里的一切，很多人认为这是不太正常的，或者说是不协调的。然而我就是喜欢，宁静的，简单的，快乐的喜欢。比我大两岁的阿阮坐在我的对面，她迷惘着美丽的眼睛吐着烟圈，悠闲而幽雅。她说：“究竟哪一种快乐值得我们用美丽和青春做代价呢？”了了的烟圈模糊了阿阮经纶世故和年轻漂亮的脸。我知道，即使是绝望来临的时候，阿阮也是美丽诱人的。我想我和阿阮应该是快乐的，也应该有快乐点缀的，在这爱情泛滥，爱情匮乏的年轻季节。我再次想起了乔的眼神，包容的，宽容的，洞穿一切的，想要陷进去，沉沦了就不想在泅渡的眼神。那个时候，我是蓝色的，单纯的，透明的，心如止水的，甚至于是完美的。我不知道是不是当现实美好到超越了梦想的时候人都会迷茫。就好象小时侯面对橱窗里面琳琅的玩具，妈妈说：“挑一个自己最喜欢的吧！”然而我却不知道自己倒底想要什么，一时间，看...　

袁岳（Victor Yuan）：在中国，中学时期的学习压力最大。中学生面临高考。来自学校的、家长的压力，使他们在心理上负担非常重。中学生第二个特点是，在信息获得渠道上比以往其他时期多。这一代中学生基本上是独生子女，父辈给予他们的空间相对比以前的中学生多。这使他们能够有更广阔的空间和更多的信息，从而形成自我主张，形成个性。第三个特点是，他们对生活的艰辛考虑较少，而勇于尝试新生活。在他们的生活价值观里，最能表现性格的事情是冒险。他们喜欢体验极限运动，甚至尝试吸毒和性。伙伴群体对塑造中学生最具影响力。这使中国的中学生更趋向美国的中学生。现在，中学生的父母在管理自己的孩子时正在失去控制能力和协调能力。在这方面，老师的能力也降低了。因为老师和家长在管教孩子时失去了参照系——不知道哪种方法是真正有效的。从总体上说，由于现在中学生是独生子女的一代，他们对家庭消费的影响力超过上一代人。...　

这篇寓言的作者把博弈论的一些基本的理论要素表现在这篇精悍的德文章中写得的确非常精妙，大家不妨耐心品位以下，那蚂蚁一直在旁边袖手微笑，待到此时，方才向狐狸说道：“狐兄豪气干云，小弟十分敬佩，倒想领略一番。”狐狸笑道：“不知蚁兄是要下里巴人还是要阳春白雪？”蚂蚁奇道：“下里巴人又如何？阳春白雪又如何？”狐狸缓缓说道：“下里巴人，至俗也，便是那乡间七旬老母，犹能听得手舞足蹈，击节而歌。却可惜譬如那山溪之水，来势汹汹，去也匆匆，入骨不过三分矣。”“那阳春白雪，又当如何？”狐狸道：“夫阳春白雪也，一望无垠，恰似大海潮生，初时广袤沉静，星光点点，不觉有异。然细心听处，远方隐隐似有天籁之音，像那闷雷滚过，却又悠扬有如长笛呜咽。待到听得更是真切之时，又有冰河破碎，清泉下流，入小河，汇大江，浩浩荡荡，终归大海，成了万丈涛声，千年不绝。”蚂蚁叹道：“怎信世间能有如此神奇之学问。你且...　

++++++++++++++++++++++++++++++++幽默大全之外国卷文学家伊　索 欧里庇得斯 萨维奇 约翰逊 切斯特顿 吉卜林 史蒂文森斯威夫特 斯克尔顿 柯南道尔 毛　姆 狄更斯 萨克雷 德纳姆沃　勒 英　瑞 克里斯蒂 萧伯纳 王尔德 谢里登 拉伯雷科　佩 拉封丹 凡尔纳 巴尔扎克 斯塔尔夫人 雨　果 科克特大仲马 小仲马 库特林 贝尔纳 费　多 埃　梅 歌　德冯达诺 拉斯维茨 海　涅 霍夫曼 克雷洛夫 赫尔岑 托尔斯泰谢甫琴科 普希金 契诃夫 盖达尔 马雅可夫斯基 但　丁 斯特林堡安徒生 莫尔纳尔 奥尼尔 马克·吐温 海明威 艾略特 杰克·伦敦欧文·肖 兰德斯 卡尔顿 考夫曼 欧尼尔 康奈利 斯克尔顿趣答问路人 古希腊寓言作家伊索（约公元前6世纪在世），一天遇见一个行人向他问路。行人：“我到城里需走多长时间？”伊索：“你走哇。”行人：“我是得走，我是问走到城里需多长时间。”...　

曹禺是我国现当代的戏剧大师，他的戏剧创作和戏剧论著所取得的卓越成就。以及他对中国戏剧事业所作出的杰出贡献是举世公认的。他不但在中国现当代戏剧发展史上具有重要的地位和影响，而且在国际剧坛上也享有盛誉。为弘扬中华文化，弘扬中国现当代文学以及戏剧的优秀传统，推动中国戏剧的发展，促进国际戏剧交流，特编辑出版《曹禺全集》。本全集邀请曹禺研究专家田本相、刘一军任主编，邀请曹禺先生的夫人李玉茹女士参加编辑。全集共分七卷，第一卷至第四卷为话剧剧本，第五卷翻译剧本和电影剧本等，并附录《曹禺年表》。各卷均按发表年月日先后编次。本全集所收作品，均采用最初版本或最初发表在报刊上的底本，参照其他版本作一些必要的校订，并作一些必要的注释，最后，经曹禺先生亲自审定。花山文艺出版社1995 年2 月25 日曹禺全集 (7）房东太太（法莫泊桑著）“彼时，”克佛尼乔治说：“我在圣柏利路一所整洁的客舍里寄居。我...　

++++++++++++++++++++++++++++++++1、一条警犬看到马路上过来一条普通狗，就气势凶凶地跑去质问它：我是警犬，你是什么东西？普通狗不屑一顾地看看它说：蠢货，看清楚点，老子是便衣！　　2、我有一个要求：请我吃饭。我希望你能满足我。否则我就把你的手机号写在墙上，前边再加两个字：办证。还要请我吃好，要不就写：征婚，男女皆可，条件不限。　　3、食人族父子打猎，其子擒一瘦子，其父曰：放，没肉！其子又擒一胖子，其父曰：放，太腻！其子又擒一美女，其父曰：带回家，晚上把你妈吃了！　　4、 一天咱俩到一口许愿井旁，我弯下腰许了个愿还望井里扔了个硬币，你也想许愿， 但你弯腰时不小心翻入井里，我被惊呆了，喃喃自语道：还真灵嘿！　　5、你我都是单翼的天使，唯有彼此拥抱才能展翅飞翔。我来到世上就是为了寻找你，千辛万苦找到你后却发现：TMD！咱俩的翅膀是一顺边的！　　6、四岁的男孩亲了三岁的女孩一口，女孩对...　

透过ASM Handbook可以了解：各种器具的制造过程，最适合使用的材料、制造流程中的相关深度讯息、哪些材料经过质量验证的程序等等信息。目录：ASM Handbook, Volume 1: Properties and Selection: Irons, Steels, and High-Performance AlloysASM Handbook, Volume 2: Properties and Selection : Nonferrous Alloys and Special-Purpose MaterialsASM Handbook, Volume 3: Alloy Phase DiagramsASM Handbook, Volume 4: Heat TreatingASM Handbook, Volume 5: Surface EngineeringASM Handbook, Volume 6: Welding, Brazing, and SolderingASM Handbook, Volume 7: Powder Metal Technologies and ApplicationsASM Handbook, Volume 8: Mechanical Testing and EvaluationASM Handbook, Volume 9: Metallography And MicrostructuresASM Handbook, Volume 10: Materials CharacterizationASM Handbook, Volume 11: Failure Analysis...　

目 录一、乔迁通用贺联-3（一）通用 4 至 5 字贺联 3（二）通用 7 至 8 字贺联 5（三）通用 9 至 24 字贺联 7二、乔迁四季贺联-9（一）春季乔迁贺联.. 9（二）夏季乔迁贺联 11（三）秋季乔迁贺联 12（四）冬季乔迁贺联 13三、大门对联-......14（一）通用 4 字大门对联 14（二）通用 5 字大门对联 16（三）通用 6 字大门对联 18（四）通用 7 字大门对联 19（五）通用 8 至 10 字大门对联- 21（六）部分名人大门对联. 22四、厅堂对联-25（一）通用 4 至 6 字厅堂对联-. 25（二）通用 7 字厅堂对联 28（三）通用 8 至 13 字厅堂对联 - 32（四）部分名人厅堂对联. 34五、卧室对联-43六、书房对联-45（一）通用 3 至 4 字书房对联-. 45（二）通用 5 字书房对联 47（三）通用 6 字书房对联 50（四）通用 7 至 12 字书房对联 - 52...　

　　　第一章知识经济与品牌时代　　第二章广告创造名牌　　第三章广告策划时势篇：审时度势　　第四章广告策划基础篇：品牌铸造　　第五章广告策划运筹篇：名牌的诞生　　第六章广告策划专业篇：广告之魂　　第七章广告策划专业篇：致胜之道　　第八章广告策划专业篇：广告创意　　第九章广告策划战术篇：广告金规　　第十章广告策划时尚篇：广告新信条　　第十一章广告策划时尚篇：明星广告　　第十二章广告策划财经篇：广告预算　　第十三章广告策划理论篇：整合营销传播内涵　　第十四章广告策划综合篇：新闻广告　　第十五章广告策划综合篇：事件行销　　第十六章广告策划综合篇：广告运动　　第十七章广告策划实战篇：危机公关　　第十八章广告策划实战篇：城市形象工程　　第一章知识经济与品牌时代　　知识经济时代　　当我们进迈入21世纪的大门时，知识经济的钟声已经敲响。迄今，人类已历经农业经济、工业经济，正步入知...　

声明：『本作品来自互联网,本人不做任何负责』内容版权归作者所有丢三落四的小豆豆 - 黑柳彻子《丢三落四的小豆豆》　缘起　　“无论是什么样的人，上天都必然赐予他一项出类拔萃的才能。可是，很多情况下，人们也许终其一生都未能发现自己的这项才能，而选择了别的职业。像爱因斯坦或毕加索这样的人物，则是正好发挥了自己的才能……”　　当我还是个女学生时，我感觉自己从这番话中找到了人生的方向。　　我已经记不清是谁告诉我这番话的了，可能是我爸爸，也可能是到我家里玩的爸爸的朋友，或者是我的伯伯。总之，我从第二天就开始着手寻找自己的才能所在，兴之所至，我尝试了好多方面。　　古典芭蕾、绘画、单杠、英文打字、训犬、西洋裁剪（现在应该称为“服装设计”了吧？可当时似乎还没有“服装设计师”这个职业名称）、变魔术、练习骑马以求成为赛马骑手……这里面却不包括弹钢琴，实际上我从五岁起就开始学钢琴，可弹得实...　

++++++++++++++++++++++++++++++++日期：2005-9-10 来源：互联网 编辑：风冷长河143 当你收到这条短信是你已经中了毒咒，唯一的解毒方法就是对着我大声说：“节日快乐”，否则你将收到我的祝福轰炸！ 0142 为庆祝三八妇女节，公司决定给女员工每人50元的节日费，男员工每人5000元的安慰费，下班前到总经理处领取过期不候。 0141 想送束花给你，却怕你误会我的意思；想写一首诗给你，却发现别人已经写过好多，我只能真诚对你说句：妇女节快乐！ 0140 当你手机响时那是我的问候；当你收到短信时那有我的心声；当你翻阅短信时那有我的牵挂；当你准备关机时，记得我今天说过三八快乐！ 4139 “一生守候”不是一句简单而苍白的山盟海誓，而是无数个平淡的日子同舟共济，相濡以沫！今天三八，是你的节日，我们来相濡以沫吧！（吐吐吐） 0138 今天是三八妇女节，我要做的是以下几条：一、太太永远是对的。二、如果太太错了，请参阅第一条。...　

++++++++++++++++++++++++++++++++笑话幽默->>魔鬼词典>>A爱情1.男女之间达到无法分离时的状态，通常是以金钱为计量单位的。2.在你觉得生活无法再好时开始，又再你觉得生活无法再坏时结束的那一段心灵状态。艾滋病消化不良所导致的友邦惊诧论，谁摊上谁就是晚年地主。哀悼告诉别人：显示同情比丧失亲人更为不幸。癌症终生的内疚，正是它蚕食着你的肉体和灵魂。安慰一种受到赞扬的欺骗行为，常常围绕某个不幸者产生。澳大利亚这个国家居民至今还没有明确的归属感，因为他们不知道自己是生活在地球上最小的大陆上，还是最大的岛屿上。癌症在废除死刑制度之后的民主、法治国度里，授予医生的一种宣判死刑的特权。安慰人人都使用过和被使用过的武器。当你安慰别人的时候你就觉得高人一等了，安慰是不用付任何代价而能用你使用过的手指揩他人的屁股。暗器未经提防的杀伤武器，以其短小、飘逸而又精明能干著称。它是以弱胜强，以小胜大的...